iColorful Days

快要升级成“送机王”了！

白师兄终于要飞UCSD了,他是lucky的，六年的时间，算是正常毕业了，还有一篇好文章在手，努力终不白费。他是个非常有计划和自制力的人，积极的思考，为人又诚恳又勤勉，尽管大我两岁，但是，还是觉得相比之下我简直太懒散自任了。还想着表面上诗意的生活，自由的精神，superficial，这就是我到现在还在为论文为毕业而劳烦的原因吧。

大院里的桂花飘香了，沁人心脾的香味散落在秋气浓郁的阳光里，方佛能抓握到手中，仔细嗅个够。天是高远的，湛蓝而点染着白云，就要让人停住心跳一般，摄人心魄。如果能停住一刻，我想化作一片葉，哪怕是一片羽毛，轻轻的在这秋日的阳光下小小的暖懶的风里飘舞。

接着上次的再写点吧，毕竟这样可以帮助整理一下自己的思路。

发现virus可以把相关的基因带入染色体并可以稳定遗传给下一代，这对ES种质性的modification是个big good news。但是，还是要解决一些关于基因整合的特异性问题。如果引入的外源基因是randomly insertion,那就是transgenic技术，应用非常有限并且可能存在非常多的uncertainty。比如可能导致正常染色体区域的中断，这些都是实现应用的重大问题。

这个时候，另外两位诺贝尔奖获得者的工作重要性就出来了。 Capecchi以及Oliver Smithies非常重要的贡献就是解决了特异性的基因修饰的问题。这时，之前在细菌里得到的基因重组的理论显示其powerful的aspect。下面会讲到这一点。

so,科学的研究都是前仆后继的，听到的一个说法是，上帝因人类始祖犯罪把永生从他们身上夺去，但是人类依靠文明的传承将整个历史串联起来，似乎在另外一种意义上延续了生命。当然，这个说法有点突出人类为了得到智慧果而与God争斗的意味：)

1958年诺贝尔奖获得者Joshua Lederberg发现在bacteria里,存在一种很有意思的现象,一条染色体上的两个同源臂,可以在分裂的时候互相交换,就是发生了同源重组.(Homologous recombination)通俗的说,就是一条拉链的两边在拉动的时候,左边的部分被置换到右边.这样,一些基因信息就发生了交换,如果同源臂上的基因有不同,这样就有可能产生有意义的变异(mutation).这个原理后来人们发现也可以应用到真核生物里,就是高等的生物中也存在这样的现象.那么显然,如果要特异性的在某个染色体区段置换入一个基因,就必需知道置入区域两端的染色体组成,然后在被置入的基因两端也加上相同的组成,这样在重组酶的作用下,就会发生外源基因特异性的代换.

 如上图示意,在染色体进一步复制过程中,蓝色部分被逐渐置换入绿色的区域.整个过程还是比较复杂的。但是具体应用起来,可以用下面的图来示意.

两边的橙色同源成分必须严格一致,这样含有外源基因的target vector在转入ES细胞后,经过重组,就可以把想要改造的基因进行置换了。

这样看上去已经完成了,但是在实际操作中,由于重组发生的效率以及转染可能存在的差异,必须有一个好的选择标记. 并且在选择压力存在之下，重组也才会更有效率.Capecchi以及Oliver Smithies首次在这个系统内用了neo以及tk的双重筛选。也就是，只有在新霉素正筛选以及胸腺嘧啶激酶的负筛选下,得到的克隆才是真正发生了重组有意义的克隆...

巴拉巴拉这么些，看得出科学工作的精妙以及繁琐细致了吧.到上面为止,真正的targetting技术才得到蓬勃的应用和发展,此后相继出现的conditional KO以及Knock in技术无非都是based on上面的进一步发展. 

中午就预报了诺奖生理医学奖的出炉时间，下午（准确说昨天）5点十分左右，果然公布了今年的winners，"for their discoveries of principles for introducing specific gene modifications in mice by the use of embryonic stem cells"。

我看到玄机bbs上有人不屑说，技术都能获奖了，诺贝尔现在“堕落”了，其实应该说，这个还是实至名归的。Gene targetting,如今改变了多少领域内的研究啊！尤其是in vivo水平的研究，是个重大的进步。直接将一个基因通过重组，注射到ES细胞里，然后生成Chimera既而得到纯合子，从而实现gene的KO或者导入，对研究一个基因的功能是相当重要的，当然结合现在的conditionla KO技术，会有更清晰的应用和阐明。再进一步说来，这个技术也是对传统的一个颠覆。任何gene在合适的条件下都可以transgenic进入mice里，说不定未来就生成了一个新的生物类型，古时候玄武麒麟等怪兽都不足为奇了。但我相信科学会在伦理许可的范围了进行，因为尽管如此，仍有许许多多的未知非人能控制，科学还是会谨慎的在影响小的范围内进行。

前些年我就在做一个课题，用这个技术，只是一个Gene targetting 的clone实在太复杂了，最终也没有成功。国内成功的也还很少，因为源于生命体上的改变，毕竟是非常complex的啊～

晚上看到opera有新的build出来，代号是9.5 alpha build 9500，采用了新的内核Kestrel，运行速度以及占用内存都得到非常之大的提高，远远超出IE以及firefox几条街。马上下来试用，结果果然如很多网友说的，在搜索栏里输入英文后转汉字输入，立马crash，对以前的feed支持也不好，折腾许久，还是等最终版吧：（

10 1好容易就过去了，待回味都不得空闲。新work week的一天是从忘记闹铃响的迟到开始。不过庆幸还赶上了一场报告会。Wen-Hwa Lee和Eva Yue-Hwa Pan Lee作的，后面的一个名字有点怪，夹杂了中文名，英文名，夫姓。两位都是从台湾去美国的华人科学家，在一个并不是太出名的大学，University of California, Irvine---应该说是加州学校里比较不famous的分校了。但是贡献很不小，世界上第一个发现抑癌基因Rb，推动了大家对癌症起因的重大认识，在tumorgenesis领域翘楚，Cell都要主动向其约稿的大牛。夫人先讲，还是很温婉的；到后来伊先生报告，风格很不一样，幽默而气势磅礴，思路清晰，脉络分明，果真牛人也。号称自己经费有三四百万---“不是RMB！”，还呼唤感兴趣的去联系postdoc。倒也是，他们实验室很多中国人，但是我想，必定也是要勤力苦干，不容易混的。

继续在写论文重复实验。天气骤然冷起来了，台风的影响，风大雨狂。早晨单车还前轮爆胎！水雨中执只孤伞，遮不住的短袖衫着在身上有些瑟瑟。夜里也是雨，回去衣服尽都湿掉。---但，此刻家中的温暖，那窗口处透出来的灯，就象冰心的《小橘灯》里的故事。。。

台风的名字都很阴柔，但是外什么却是那么凶厉？下面好像还有个叫“杨柳”的，呵呵，俄娜多姿啊。